PENGARUH SUHU PENYIMPANAN HUMAN PLATELET LYSATE (HPL) TERHADAP KUALITAS PROLIFERASI KULTUR SEL PRIMER GINJAL MENCIT (Mus musculus)

Abstract

Human platelet lysate (HPL) berpotensi sebagai alternatif dari Fetal Bovine Serum (FBS) untuk media kultur sel. HPL diproduksi dari Thrombocyte Concentrate (TC) berkualitas yang telah melewati masa simpan melalui siklus freeze thawing. Penelitian bertujuan untuk  mengevaluasi pengaruh suhu penyimpanan HPL terhadap kadar glukosa dan protein total serta menentukan konsentrasi HPL yang efektif mendukung proliferasi kultur sel primer ginjal mencit. Penelitian ini dilaksanakan dalam 2 tahap.  Pada tahap 1 diuji efek suhu (-20°C dan -80°C) dan lama penyimpanan HPL (1-4 minggu) terhadap kandungan glukosa dan protein total. Pada tahap 2 diuji efek HPL yang telah disimpan pada tahap-1 dengan konsentrasi masing-masing 5% dan 10% serta 10% FBS sebagai kontrol terhadap sel-sel ginjal mencit (Mus musculus). Kultur dilaksanakan selama 2 hari dalam DMEM yang mengandung serum uji, 5% penicillin-streptomycin, dan 0,5% fungizone. Variabel kultur berupa densitas, viabilitas dan morfologi sel. Penyimpanan HPL pada suhu -20oC dan -80oC tidak secara signifikan berpengaruh terhadap kadar glukosa namun menurunkan kadar protein total dalam HPL. Sel-sel ginjal mencit yang dikultur dalam medium dengan suplemen HPL 5% yang telah disimpan pada -80oC memiliki viabilitas tertinggi (83,13±2,71%) dan densitas tertinggi (2,0±0,5x105 sel/mL). Sel hasil kultur memiliki bentuk bulat namun belum dapat diindentifikasi tpe sel secara spesifik. Berdasarkan kadar glukosa dan protein total kualitas HPL dapat dipertahankan pada suhu suhu -20oC maupun -80oC. Profilerasi dan viabilitas sel-sel ginjal mencit tertinggi dapat diperoleh dengan menambahkan 5%HPL (yang telah disimpan pada -80oC) ke dalam medium kultur.