Evaluasi Konsentrasi Human Platelet Lysate yang Optimum untuk Mendukung Viabilitas Sel-Sel Hati Mencit (Mus musculus) Selama Cryopreservation dan Kultur Post-Thawing
Abstract
Kultur sel hewan merupakan suatu proses dimana sel-sel dari jaringan hewan ditempatkan dan ditumbuhkan dalam lingkungan yang sesuai di luar tubuhnya. Kultur sel memerlukan serum sebagai suplemen, serum yang sering digunakan adalah Fetal Bovine Serum (FBS). Namun, penggunaan FBS memiliki keterbatasan, termasuk biaya tinggi dan dampak negatif terhadap kesejahteraan hewan. Human Platelet Lysate (HPL) yang dihasilkan melalui proses freezing-thawing dari Platelet Concentrate (PC) berkualitas baik dapat dijadikan sebagai alternatif pengganti FBS. Tujuan dari peneitian ini adalah untuk mengetahui konsentrasi HPL yang optimum untuk mendukung viabilitas dan densitas pada cryopreservation sel hati mencit (Mus musculus) serta mengetahui konsentrasi HPL yang sesuai untuk mendukung viabilitas, densitas, dan morfologi pada kultur sel post-thawing hati mencit (Mus musculus). Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental dalam dua tahapan eksperimental berkelanjutan yaitu dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri dari 5 perlakuan (FBS 20%, HPL 25%, HPL 20%, HPL 15%, dan HPL 10%) dengan 5 ulangan pada proses cryopreservation dan 5 perlakuan (FBS 20%, HPL 25%, HPL 20%, HPL 15%, dan HPL 10%) dengan 3 ulangan pada kultur post-thawing cryopreservation selama 21 hari. Berdasarkan hasil penelitian, pada cryopreservation sel-sel hati mencit selama 21 hari, pemberian suplemen serum HPL 15% mampu mempertahankan viabilitas dan densitas sel-sel hati mencit, sedangkan HPL 25% mampu mempertahankan viabilitas dan densitas sel-sel hati mencit pada cryopreservation selama 28 hari. Sel-sel hati yang telah di-cryopreserved selama 21 hari dan telah dikultur dengan penambahan konsentrasi HPL 25% dalam medium memiliki morfologi bentuk sel poligonal dengan inti di tengahnya.
References
Bahsoun, S., Coopman, K., & Akam, E., (2020). Quantitative Assessment of the Impact of Cryopreservation on Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells: up to 24h Post-Thaw and Beyond. Stem Cell Research & Therapy, 11(1): 1-15.
Burnouf, T., Strunk, D., Koh, M., & Schallmoser, K., (2016). Human Platelet Lysate: Replacing Fetal Bovine Serum as a Gold Standard for Human Cell Propagation. Biomaterials, 76(1): 371-387.
Caneparo,C., Chabaud, S., Fradette, J., & Bolduc, S., (2022). Evaluation of a Serum Free Medium for Human Epithelial and Stromal Cell Culture. Internasional Journal of Molecular Sciences, 23(1): 1-17.
Devitt, S., Carter, C., Dierov, R., Weiss, S., Gersch, R., & Percec, I., (2015). Successful Isolation of Viable Adipose-Derived Stem Cells from Human Adipose Tissue Subject to Long-Term Cryopreservation: Positive Implications for Adult Stem Cell-Based Therapeutics in Patients of Advanced Age. Stem Cells Internasional, 13(1): 1-11.
Fazzina R, Iudicone P, Mariotti A, Fioravanti D, Procoli A, Cicchetti E, Scambia G, Bonanno G, Pierelli L., (2016). Culture of human cell lines by a pathogen-inactivated human platelet lysate. Cytotechnology, 68(4):1185-95.
Gazali, M., & Tambing, S., (2002). Kriopreservasi Sel Spermatozoa. Hayati, 9(1): 27-32.
Godoy, P., Hewitt, N., & Albrecht, U., 2013. Recent Advances in 2D and 3D in vitro Systems Using Primary Hepatocytes, Alternative Hepatocytes Sources and Non-Parenchymal Liver Cells and Their Use in Investigating Mechanisms of Hepatoxicity, Cell Signaling and ADME. Arch Toxicol, 87(1): 1315-1530.
Guiotto, M., Raffoul, W., Hart, A., Riehle, M., & Summa, P., (2020). Human Platelet Lysate to Substitute Fetal Bovine Serum in hMSC Expansion for Translational Applications. Journal of Translational Medicine, 18(351): 1-14.
Li, Y., Tan, J., & Li, L., (2010). Comaprison of Three Methods for Cryopreservation of Human Embryonic Stem Cells. Fertil Steril, 3(3): 999-1005.
Masson, P., & Lushchekina, S., (2022). Conformational Stability and Denaturation Processes of Proteins Investigated by Electrophoresis under Extreme Conditions. Molecules, 27(1): 1-31.
Maulida, D., Nur, F., Eriani, K., & Muchlisin, Z., (2020). Tinjauan Kepustakaan Tentang Kriopreservasi Sperma Ikan Asli Indonesia. Jurnal Ilmu-Ilmu Perairan, Pesisir, dan Perikanan, 9(2): 141-150.
Mentari, D., Pebrina, R., & Nurpratami, D., (2020). Human Platelet Lysate (HPL) as an Alternative Media Propagation of T47D Cells Line. Indonesian Journal of Cancer Chemoprevention, 11(1): 36-45.
Oeller, M., Plamberger, S., Krisch, L., Rohde, E., Strunk, D., & Schallmoser, K., (2021). Human Platelet Lysate for Good Manufacturing Practice-Compliant Cell Production. Molecular Sciences, 22(1): 1-14.
Palombella, S., Orfei, C., Castellini, G., Gianola, S., Lopa, S., Mastrogiacomo, M., Moretti, M., & Girolamo, R., (2022). Systematic Review and Meta-Analysis on The Use of Human Platelet Lysate for Mesenchymal Stem Cell Cultures: Comparisons with Fetal Bovine Serum and Considerations on The Productions Protocol. Stem Cell Research & Therapy, 13(142): 1-31.
Tuschl, G., & Mueller, S., (2006). Effects of Cell Culture Conditions on Primary Rat Hepatocytes Cell Morphology and Differential Gene Expression. Toxicology, 218(1): 205-215.
Uhrig, M., Ezquer, F., & Ezquer, M., (2022). Improving Cell Recovery: Freezing and Thawing Optimization of Induced Pluripotent Stem Cells. Cells, 11(799): 1-19.
Utami, R., Ducha, N., & Purnama, E., (2019). Kajian Bovine Serum Albumin (BSA) dalam Pengencer Caudal Epidydymal Plasma-D (CEP-D) Terhadap Motilitas Spermatozoa Sapi Limousin Sebelum dan Sesudah Pembekuan. LenteraBio, 8(3): 255-259.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
